細(xì)胞加藥真的很讓人頭疼，加多了不要幾個小時，細(xì)胞就到了了無生機(jī)的地步，加少了根本沒辦法實現(xiàn)自己的理想的模型，藥物的有效性和安全性與細(xì)胞內(nèi)藥物的濃度密切相關(guān)。因此，掌握細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的計算方法對于藥物研究至關(guān)重要。

1. 正常的我們都按照以下計算公式給細(xì)胞加藥：

細(xì)胞內(nèi)藥物濃度 = 給藥濃度 × 細(xì)胞攝入率 × 細(xì)胞量 / 細(xì)胞體積

那么細(xì)胞給藥我們需要確定哪些呢，別急，聽我慢慢道來：

一、確定單體組分的化學(xué)性質(zhì)，是親水的還是親脂性的；

常見的溶劑有水、醇、DMSO，丙酮，一般DMSO溶解的藥要稀釋1000倍才能用，因為這個濃度下才能剔除溶劑本身的毒性作用。以最大溶解濃度，稀釋1000倍作為最高濃度，然后依次稀釋。如果藥物有抑制作用，需采用改良寇氏法，算出一個IC50值，初步可以確定給藥的最大和最小劑量。

改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)

Xm:lg 最大劑量

I:lg(最大劑量/相臨劑量)

P:陽性反應(yīng)率之和

Pm:最大陽性反應(yīng)率

Pn:最小陽性反應(yīng)率

舉個例子：各組濃度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001，稀釋倍數(shù)為10，最大濃度為0.1，抑制率為0.95、 0.80、0.65、0.43、0.21，0.06。代入

計算公式：

Pm=0.95

Pn=0.06

P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1

Xm=lg0.1=-1

lgI=lg0.1/0.01=1

lgIC50=-1-1*(3.1-(3-0.95-0.06)/4)=-3.6025

IC50=0.00025

二、藥物的添加方式

目前分為溶液添加和細(xì)胞膜添加兩種方式，第一種方式簡單，但可能會影響細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，細(xì)胞膜添加的方式則更加有效地顯示藥物在細(xì)胞內(nèi)的特定功能。

三、一定要考慮藥物的添加時間

藥物的添加時間應(yīng)該足夠長，以便藥物有足夠的時間發(fā)揮作用，同時也應(yīng)該考慮到實驗的穩(wěn)定性，以避免細(xì)胞產(chǎn)生的變異，同時需要考慮給藥的次數(shù)，是一次性給藥還是分多次給藥，一次性給藥可以有效地影響細(xì)胞的表型，但其結(jié)果可能不太穩(wěn)定；多次給藥可以穩(wěn)定影響細(xì)胞的表型，但結(jié)果可能不太明顯。