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屏障功能檢測(cè)不可缺少的TEER操作SOP

TEER（Trans-Epithelial/Endothelial Electrical Resistance，跨上皮/內(nèi)皮電阻）實(shí)驗(yàn)是評(píng)估細(xì)胞單層屏障完整性、緊密連接形成及離子通透性的標(biāo)準(zhǔn)方法，廣泛應(yīng)用于血腦屏障(BBB實(shí)驗(yàn)）、腸道屏障、呼吸道上皮等模型。其操作原理是通過(guò)歐姆定律來(lái)檢測(cè)細(xì)胞形成的屏障的完整性，電阻值越高，表明細(xì)胞間緊密連接越完整，屏障功能越強(qiáng)

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B細(xì)胞的提取和操作

B細(xì)胞在免疫發(fā)展中發(fā)揮中心作用。他們?cè)诠撬柚凶畛踹M(jìn)入血液作為幼稚B細(xì)胞，其可以遷移到淋巴組織，諸如脾，淋巴結(jié)，扁桃體，為進(jìn)一步發(fā)展，一些幼稚B細(xì)胞遷移到淋巴濾泡，其中生發(fā)中心B細(xì)胞可以分化成記憶B細(xì)胞和plasmablasts(PBS)/漿細(xì)胞(PC)的。雖然大多數(shù)PBS/PC最終進(jìn)入血液，少數(shù)最終駐留在骨髓經(jīng)受終端分化為長(zhǎng)壽命的漿細(xì)胞。

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一文搞定：細(xì)胞生長(zhǎng)周期同步化

養(yǎng)了細(xì)胞后就會(huì)發(fā)現(xiàn)，即使是一瓶細(xì)胞，但是每個(gè)細(xì)胞的分裂時(shí)間卻不一致，有些已經(jīng)分裂生長(zhǎng)完成了，有些細(xì)胞還在分裂初始，但是在大部分實(shí)驗(yàn)中，都需要細(xì)胞保持生長(zhǎng)周期同步化，才能讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更為精確。因此，只能進(jìn)行人工干預(yù)啦。

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成纖維細(xì)胞的表型標(biāo)志及研究匯總

1.成纖維細(xì)胞是具有高度異質(zhì)性的細(xì)胞群體，其表型分類(lèi)主要基于細(xì)胞提取的位置和細(xì)胞功能兩大類(lèi)別 2.成纖維細(xì)胞的研究方向可歸納為六大核心領(lǐng)域

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內(nèi)皮細(xì)胞的研究表型匯總

內(nèi)皮細(xì)胞是多個(gè)課題的研究熱點(diǎn)，內(nèi)皮細(xì)胞分為以下5種研究表型： 1.通用標(biāo)志物 2.功能狀態(tài)相關(guān)表型 3.組織特異性表型;不同器官的內(nèi)皮細(xì)胞具有特異性標(biāo)志物和功能; 4.其次內(nèi)皮細(xì)胞還可分泌多種細(xì)胞因子、趨化因子和細(xì)胞外基質(zhì)成分，形成特定的“分泌表型” 5.循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CECs）表型

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實(shí)用干貨：細(xì)胞裂解的步驟的1.2.3

預(yù)準(zhǔn)備： 預(yù)冷離心機(jī)、PBS、裂解液（RIPA 或 NP-40 等） 裂解液臨用前加蛋白酶/磷酸酶抑制劑（PMSF 1 mM或Na?VO? 1 mM或leupeptin 1 μg/mL 等）

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收藏起來(lái)：LUC標(biāo)記的小動(dòng)物成像輕松做！

問(wèn)：LUC標(biāo)記細(xì)胞小動(dòng)物成瘤后檢測(cè)底物需要注射到腫瘤部位嗎? 答：在活體生物發(fā)光成像（BLI）中，D-熒光素（luciferin）經(jīng)腹腔（IP）或皮下（SC）注射后即可通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)全身各處，與已表達(dá)熒光素酶的腫瘤細(xì)胞反應(yīng)，因此無(wú)需直接注射到腫瘤局部即可實(shí)現(xiàn)成像。

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常見(jiàn)的EGFR高表達(dá)的細(xì)胞株

EGFR過(guò)表達(dá)，可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞形成、增殖、黏附、轉(zhuǎn)移和血管形成。 以下是常用腫瘤細(xì)胞系 EGFR 表達(dá)水平速查表 （高 ≥ A431 的 50%；中 10–50%；低 < 10%，或≈陰性對(duì)照）

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匯總文獻(xiàn)告訴你：遇到細(xì)胞空泡怎么辦？

細(xì)胞突然出現(xiàn)空泡，會(huì)不會(huì)細(xì)胞老化的特征？ 答：有參考表明細(xì)胞空泡化被認(rèn)為是細(xì)胞衰老過(guò)程中可能出現(xiàn)的形態(tài)學(xué)變化之一；也有資料指出，空泡化可能由多種因素引起，如感染或代謝障礙，并非衰老所特有；標(biāo)題是《Cellular Senescence in Health, Disease, and Lens Aging》，提供關(guān)于衰老細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化的詳細(xì)描述，細(xì)胞空泡可以是細(xì)胞衰老的一個(gè)標(biāo)志，但并非絕對(duì)，有部分細(xì)胞會(huì)在培養(yǎng)的過(guò)程中一直會(huì)有微量的空泡產(chǎn)生。

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實(shí)用干貨：細(xì)胞骨架染色

細(xì)胞骨架染色是一種重要的生物學(xué)技術(shù)，通過(guò)特定的熒光染料或抗體標(biāo)記細(xì)胞骨架成分，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的研究

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基礎(chǔ)培養(yǎng)基凍上了，會(huì)影響使用嗎？

套裝培養(yǎng)基在到貨的時(shí)候； 發(fā)現(xiàn)基礎(chǔ)和套裝的因子都凍上了； 總是很擔(dān)心基礎(chǔ)會(huì)不會(huì)失效；

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看完不再懵，腫瘤干細(xì)胞成球后染色操作

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值得收藏：WB實(shí)驗(yàn)的緩沖液配方

Western blot是一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于檢測(cè)和分析蛋白質(zhì)的存在和表達(dá)水平。Western blot包括蛋白質(zhì)提取、電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫染色等步驟。下面是一些常用的Western blot相關(guān)緩沖液（Buffer）配方。

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實(shí)用干貨：小鼠的肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞提取步鄹

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掌握這6個(gè)細(xì)節(jié)，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)一次成功！

傷口愈合試驗(yàn)，也通常稱(chēng)為“劃痕試驗(yàn)”，是一種廣泛建立的研究體外集體細(xì)胞遷移的技術(shù)。細(xì)胞劃痕（Wound Healing)是一種操作簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗(yàn)方法。其實(shí)驗(yàn)原理是，當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到融合成單層狀態(tài)時(shí)，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個(gè)空白區(qū)域，稱(chēng)為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。

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