細(xì)胞球體or成團(tuán)傻傻分不清楚？

很多同學(xué)都覺得構(gòu)建細(xì)胞球體太不重要了 ，培養(yǎng)基也不重要，培養(yǎng)板也不重要 ，要么怎么可能有懸浮細(xì)胞呢？ 懸浮細(xì)胞不就一養(yǎng)就懸浮了？ 甚至有些細(xì)胞三天不加液不換液不就聚團(tuán)了嗎？

懸浮細(xì)胞成團(tuán)主要有以下幾個原因：

1.消化過程過于粗暴、吹打太用力、消化過久、消化液太強(qiáng)或有毒性等，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，細(xì)胞死亡后釋放出DNA，纏繞其他細(xì)胞，形成黏性的細(xì)胞團(tuán)。

2. 細(xì)胞離心速度過大或時間太長，也容易造成細(xì)胞抱團(tuán)。

3. 消化不完全時，細(xì)胞和細(xì)胞之間的連接沒有分開；消化過度時，圓形的細(xì)胞容易聚堆，再分開很困難。

4. 狀態(tài)不好、老化的細(xì)胞，也可能會出現(xiàn)抱團(tuán)生長的情況，比如換液不及時、長得太滿才傳代、污染等造成的細(xì)胞狀態(tài)差。

5. 傳代時沒有吹打均勻，細(xì)胞團(tuán)多，培養(yǎng)時就會是一團(tuán)一團(tuán)的。

6. 非震蕩培養(yǎng)或細(xì)菌量過多的話就會成團(tuán)

這種聚團(tuán)并不是細(xì)胞球體，細(xì)胞球體主要是由細(xì)胞間粘附形成，使用生長培養(yǎng)物的物理或者化學(xué)性質(zhì)促使細(xì)胞聚集在一起形成3D結(jié)構(gòu)。可以由細(xì)胞株、原代細(xì)胞或組織的片段構(gòu)建。

細(xì)胞球體：具有較為規(guī)則的球形結(jié)構(gòu)，內(nèi)部細(xì)胞和外部細(xì)胞的生長環(huán)境和狀態(tài)可能存在差異，例如接近外表面的細(xì)胞灌注良好，代謝活躍，增殖快速，而球體的最內(nèi)部細(xì)胞灌注相當(dāng)差，代謝和增殖趨于停滯，在較大的細(xì)胞球內(nèi)部甚至出現(xiàn)細(xì)胞壞死。

細(xì)胞球體：一般需要在非依賴型（anchorage-independent condition）的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，選用低吸附培養(yǎng)板加腫瘤干細(xì)胞成球培養(yǎng)基（啟達(dá)生物,貨號：P2401）培養(yǎng);

細(xì)胞成球后使用共聚焦顯微拍攝                          細(xì)胞成團(tuán)后使用共聚焦顯微鏡拍攝

兩者的科研應(yīng)用：

細(xì)胞成團(tuán)：通常需要避免細(xì)胞成團(tuán)，以保證細(xì)胞培養(yǎng)的正常進(jìn)行。

細(xì)胞球體：廣泛用于評估藥物有效性和毒性的篩查試驗，還可用于研究腫瘤行為、耐藥性以及癌細(xì)胞與其微環(huán)境之間的相互作用，此外，以治療為目的將球體向患者移植的研究也正在進(jìn)行，且在缺血性疾病及肝病治療方面，球體的有效性已獲認(rèn)可.

培養(yǎng)基：TSCM腫瘤干細(xì)胞成球培養(yǎng)基（啟達(dá)生物，P2401)

1. 球體培養(yǎng)無需支架，通過貼壁細(xì)胞趨向于聚集的特性形成細(xì)胞球體

2. 大部分腫瘤細(xì)胞株可直接使用TSCM成球

3. 可培養(yǎng)復(fù)雜的球體和類器官

4 .可維持同質(zhì)腫瘤球的傳代和擴(kuò)增

5 .無血清無直接動物源蛋白組分，可保持實驗的統(tǒng)一性和可驗證性。