在購買細胞的時候，很多細胞都會寫著P3，特別是原代細胞，往往給很多客戶造成誤解？ 你怎么可以發(fā)給我P3代的原代，很多人都會去問，為什么不發(fā)P0代？

我們來看看細胞是怎么標記代次的：

如果把從組織中提取出來的貼壁細胞稱之為P0代，那么第一次進行酶消化后的細胞就是P1代，為什么進行酶消化 ，因為P0代的細胞通常純度不高，所以要爭取更大的密度去進行磁珠篩選，我們一般會在P1代傳代時進行磁珠篩選，篩選后的細胞長滿后，進行穩(wěn)定擴增一代，這時候已經(jīng)時P2代 ，穩(wěn)定擴增的這一代細胞就可以凍存保種了，這就是P3代的由來，實際是P2代凍存，所以它解凍復蘇時仍是凍存管標記的P3代。

就比如你有一個工作細胞系 第1代（P1），然后用胰蛋白酶消化并冷凍這些細胞，然后把小瓶標記為 P2解凍后，它們?nèi)匀?/span> P2 直到你再次對它們進行傳代，此時它們就變成了 P3。

為什么大部分原代細胞說明的是倍增次數(shù)（PD)而不是傳代次數(shù)？
· 研究員 A 使用 10:1 的比例分割 P6 的培養(yǎng)物。
· 研究員 B 在 P6 時以 1:10 的比例分割相同的培養(yǎng)物。
· 兩人都將下一個燒瓶標記為 P7。

然而，1:10 分裂的細胞必須增殖更多才能達到匯合，這意味著它們會經(jīng)歷的細胞倍增次數(shù)（PD）更多。 隨著時間的推移，即使傳代次數(shù)相同，也會導致細胞在基因和功能上有所不同。

因此細胞的鋪板和凍存密度一定要注意！

比如內(nèi)皮和神經(jīng)元細胞，需要細胞與細胞能互相接觸才能自身產(chǎn)生細胞生長因子，細胞生長的更快而且形態(tài)也規(guī)整，而成纖維細胞 ，偶爾稀疏點也能長起來，普遍的細胞鋪板標準，不能低于整體匯合度的30%,使用正確的培養(yǎng)基，在細胞沒有任何受損的情況下它們基本都能長起來。

那么什么是細胞匯合？ 

匯合度不是直接計數(shù)細胞，而是 表面覆蓋度的視覺評估. 例如，70％匯合的培養(yǎng)瓶有70％的表面積被貼壁細胞占據(jù)。

匯合度可以幫您確定：
· 何時分裂或傳代細胞
· 轉(zhuǎn)染或藥物治療的最佳時間
· 培養(yǎng)物是否適合分化、重編程或收獲等下游應用

細胞過度匯合會帶來什么？
· 營養(yǎng)耗竭 和 代謝壓力
· 細胞進入生長平鼎期、造成細胞衰老或凋亡

· 垂死細胞積累有毒的細胞碎片
· 細胞擠壓造成的形態(tài)和基因表達改變

· 更高污染的風險，特別是真菌或細菌

怎么更好的培養(yǎng)出讓你滿意的細胞，還有最重要的一點就是：不隨意更換細胞的培養(yǎng)方式 ，內(nèi)皮的細胞采用內(nèi)皮的培養(yǎng)基，成纖維的采用成纖維的培養(yǎng)基，這樣細胞從始到終表達的蛋白基本會保持一致。

最后推薦一下以下兩款培養(yǎng)基：
ECGM內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基（貨號：P1001）

1.BBB實驗首選共培養(yǎng)培養(yǎng)基，適用于大部分血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)，擴增和傳代，還分大小鼠和人源的哦。
2.采用小分子化合物抑制雜細胞生長，添加促內(nèi)皮生長因子讓內(nèi)皮細胞生長grow，grow，grow。
3.低血清組分減少血清在細胞內(nèi)的干擾。
4.經(jīng)60多種內(nèi)皮細胞驗證生長速度；可平替進口品牌。
5.套裝發(fā)貨，配制簡單，使用方便。

FGCM成纖維細胞培養(yǎng)基（貨號：P6001）

1.專門用于原代成纖維細胞培養(yǎng)的低血清培養(yǎng)基。
2.超低血清配方，血清含2%。
3.含有小分子化合物抑制雜細胞生長。
4.添加成纖維細胞生長所需蛋白，使用FGM成纖維細胞培養(yǎng)基可提高細胞活性和純度。