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細胞實驗需要準(zhǔn)備些什么?

來源:啟達生物  瀏覽量:2489  發(fā)布時間:2020-12-02

1. 常用的吸量管有:

奧氏吸量管、移液管、刻度吸量管

2. 如何正確使用吸量管?

答:(1) 選用原則:就近原則

(2) 吸量管的使用:吸--調(diào)-

3. 如何正確使用微量加樣器?

答:轉(zhuǎn)----

4. 如何正確使用離心機?

放置-裝管-平衡-啟動-取出

5. 細胞培養(yǎng)必需設(shè)備有哪些?

答:細胞培養(yǎng)必需設(shè)備有超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、液氮生物容器、壓力蒸汽消毒器、無菌過濾器、電熱干燥箱、離心機、細胞計數(shù)板和冰箱等。

6. 無菌操作技術(shù)包括哪些內(nèi)容?

答:1. 保持安靜、整潔的無菌工作區(qū)域; 2. 保持干凈整潔的工作面; 3. 注意個人衛(wèi)生;4. 在潔凈工作臺內(nèi)無菌操作

7.實驗一貼壁細胞的傳代培養(yǎng)

7.1.何謂貼壁細胞?

答:貼壁細胞又稱錨著依賴性細胞,是指賴于貼附在培養(yǎng)器皿表面生長的細胞,大多數(shù)培養(yǎng)細胞屬于此類。細胞附著或貼附于底物表面上,呈現(xiàn)出極性細胞的典型形態(tài)過程,稱為貼壁。貼壁是貼附類細胞生長增殖的條件之一。

7.2. 貼壁細胞的傳代培養(yǎng)的實驗原理是什么?

答:細胞的貼壁是通過特異的細胞表面受體與細胞外基質(zhì)分子結(jié)合而實現(xiàn)的,細胞在鋪展之前,細胞已分泌了細胞外基質(zhì)和蛋白聚糖。細胞外基質(zhì)先粘著在帶電荷的培養(yǎng)基質(zhì)上,然后,細胞再通過特異的受體附著到基質(zhì)上。蛋白酶可消化細胞外基質(zhì),甚至通過降解跨膜蛋白的胞外區(qū)使單層培養(yǎng)的貼壁細胞彼此分離。上皮細胞一般不易解離,因為它們通過緊密連

接復(fù)合體使細胞結(jié)合在一起;間充質(zhì)間結(jié)合則更多地依賴基質(zhì)的作用,因此容易分離。

7.3.細胞的計數(shù)方法是什么?

n/4*104 *稀釋倍數(shù)

7.4.怎樣鑒別死、活細胞?

臺盼藍染色法。

7.5. 怎樣進行細胞計數(shù)?

答:低倍鏡下按一定方向逐格計數(shù)板內(nèi)四個角的每格大格中的呈透亮的細胞數(shù)。若細胞正好壓在格線上,則按數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則計數(shù)。


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