凍存細(xì)胞的錯(cuò)誤的時(shí)機(jī)主要有：細(xì)胞量太少，細(xì)胞狀態(tài)不好，細(xì)胞變形嚴(yán)重，或者細(xì)胞生長堆積，一旦生長過平頂期，培養(yǎng)基就會(huì)變得很黃，細(xì)胞可疑污染；鏡下觀察細(xì)胞有很多碎片或者不明物；培養(yǎng)時(shí)間過長，連續(xù)培養(yǎng)超過二個(gè)月，細(xì)胞性狀已有改變）。

解決方法：選擇細(xì)胞凍存的最佳時(shí)機(jī)：細(xì)胞增殖旺盛，情況穩(wěn)定，試驗(yàn)效果良好，復(fù)蘇后兩周內(nèi)。

1. 細(xì)胞太少：凍存時(shí)細(xì)胞濃度低于 1-5×1000,000/ml。（復(fù)蘇很難成功）。原因：細(xì)胞和細(xì)胞間會(huì)又間隙接觸反應(yīng), 解決：離心后調(diào)整細(xì)胞濃度，把細(xì)胞種更小的孔板中

2. 培養(yǎng)基很黃時(shí)，凍存復(fù)蘇后幾天不長：在細(xì)胞生長平頂期凍存的細(xì)胞會(huì)在解凍后有幾天停滯狀態(tài)，原因：細(xì)胞在生長平頂期已經(jīng)停止生長，凍存后也保持互相間抑制的信號(hào)，解決辦法：用胰酶消化重新鋪板；

3. 細(xì)胞污染：凍存管的蓋子一定要擰緊，否則復(fù)蘇水浴時(shí)會(huì)滲水，造成污染。復(fù)蘇細(xì)胞的時(shí)候盡量避免凍存管接縫處沾水。

4. 程序降溫盒導(dǎo)致的細(xì)胞復(fù)蘇不活：放在－80 度的凍存盒，壁太薄，細(xì)胞在被迅速降溫，使用普通的凍存液抗氧化和抗凍添加物不夠，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量冰晶殺死細(xì)胞.

解決辦法：使用上海啟達(dá)免程序細(xì)胞凍存液含血清（貨號(hào)：SD0001）或免程序無血清凍存液（貨號(hào)：SD0002）成品凍存液，含有抗氧化因子，可在細(xì)胞凍存時(shí)防止細(xì)胞產(chǎn)生氧化反應(yīng)，給細(xì)胞一個(gè)完美的休眠環(huán)境，含有抗凍組分，讓大部分細(xì)胞免受冰晶殺戮。

5 . -80 度太久導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不好，原因：冰箱的溫度難以恒定：開門 / 關(guān)門，電壓不穩(wěn)等.解決辦法：盡快轉(zhuǎn)入液氮。

6. 液氮不足：液面不能漫過所有細(xì)胞。解決：定期測量液氮儲(chǔ)備，保證細(xì)胞全部浸在液面下，小提醒：有幾個(gè)細(xì)胞需要?dú)庀啾４娴?，不能浸入液氮里，挪?xì)胞的時(shí)候需要注意一下。

7. 取錯(cuò)細(xì)胞：找不到 / 拿錯(cuò)凍存管。原因：沒有標(biāo)記好細(xì)胞，沒有做好庫存記錄，解決：每支凍存管都標(biāo)上細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間，并記錄在冊(cè)。