間充質(zhì)干細胞成脂分化試劑盒是自主研發(fā)的一款用于細胞脂肪誘導(dǎo)分化的低血清培養(yǎng)基，使用此培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，可用于骨髓、臍帶、脂肪等組織來源的細胞進行誘導(dǎo)脂肪分化。

培養(yǎng)基配方：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：500ml (P1300) ，細胞生長因子 5ml (P2002) ，脂肪細胞誘導(dǎo)因子 5ml (P1304)，胎牛血清：10ml（SD0200），G/A：5ml(SD0038）

l 誘導(dǎo)分化程序簡單便捷。

l 誘導(dǎo)成脂細胞效率高。

成骨誘導(dǎo)步驟：

一、 使用細胞細胞包被液包被細胞培養(yǎng)板，將傳代或復(fù)蘇凍存的細胞接種到6孔板上，密度為2×105 -3×105 cells/cm2或2×105 -3×105 cells/孔，只添加P2002干細胞生長因子,基礎(chǔ)，血清和生長因子比例：    （100：5：1），置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當(dāng)細胞匯合度達到80%-90%時，用P1304脂肪誘導(dǎo)細胞因子重新配制培養(yǎng)基，基礎(chǔ)，血清和生長因子比例：（100：1 : 1）,小心的將孔內(nèi)細胞培養(yǎng)基吸掉，用PBS清洗兩次，向6孔板中加入2mL細胞脂肪分化培養(yǎng)基,以此記為第0天

二、細胞誘導(dǎo)前可使用細胞包被液 貨號：SD0044進行細胞包被，以便細胞更好的進行貼壁。

三、每隔1-2天更換新鮮的細胞脂肪分化培養(yǎng)基；

注意：為防止脂肪細胞脫落，建議誘導(dǎo)過程中出現(xiàn)大量脂肪細胞結(jié)節(jié)之后，換液形式變?yōu)槊刻煲淮伟肓繐Q液。

四、 誘導(dǎo)14-21天期間，視細胞的形態(tài)變化及生長情況進行染色。

五、誘導(dǎo)脂肪分化結(jié)束后，吸掉6孔板中的脂肪分化培養(yǎng)基，用PBS沖洗1-2次。每孔加入1 mL細胞固定液，固定10~30 min；

六、 吸掉細胞固定液，PBS沖洗2次。每孔加入2 mL脂肪細胞檢測染液，染色3-5 min；

七、 吸掉檢測染液，用PBS沖洗2-3次；

八、將培養(yǎng)板置于顯微鏡下觀察染色效果

備注：100ml瓶裝無套件，為整瓶配制。

聲明：產(chǎn)品僅科研使用。

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