間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化試劑盒是自主研發(fā)的一款用于人間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)軟骨分化的低血清培養(yǎng)基，使用此培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，可用于骨髓、臍帶、脂肪等組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)軟骨分化。

培養(yǎng)基配方：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：500ml (P1300) ，細(xì)胞生長(zhǎng)因子 5ml (P2002) ，成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)因子 5ml (P1306)，胎牛血清：5ml（SD0200），G/A：5ml(SD0038）

l 誘導(dǎo)分化程序簡(jiǎn)單便捷。

l 誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞效率高。

                                   間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨誘導(dǎo)（Day12)

誘導(dǎo)步驟：

一、 使用細(xì)胞細(xì)胞包被液包被細(xì)胞培養(yǎng)板，將傳代或復(fù)蘇凍存的干細(xì)胞接種到6孔板上，密度為2×105 -3×105 cells/cm2或2×105 -3×105 cells/孔，置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當(dāng)使用細(xì)胞生長(zhǎng)因子到細(xì)胞匯合度達(dá)到80%-90%時(shí)，小心的將孔內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基吸掉，向6孔板中加入2mL細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基,以此記為第0天；

注意：需使用細(xì)胞包被液 貨號(hào)：SD0044進(jìn)行細(xì)胞包被。

二、每隔1-2天更換新鮮的細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基；

注意：為防止軟骨細(xì)胞脫落，建議誘導(dǎo)過程中出現(xiàn)大量鈣結(jié)節(jié)之后，換液形式變?yōu)槊刻煲淮伟肓繐Q液。

三、 誘導(dǎo)14-21天期間，視細(xì)胞的形態(tài)變化及生長(zhǎng)情況進(jìn)行染色。

四、誘導(dǎo)成骨分化結(jié)束后，吸掉6孔板中的軟骨分化培養(yǎng)基，用PBS沖洗1-2次。每孔加入1 mL細(xì)胞固定液，固定10~30 min；

五、 吸掉細(xì)胞固定液，PBS沖洗2次。每孔加入2 mL軟骨檢測(cè)染液，染色3-5 min；

六、 吸掉軟骨檢測(cè)染液，用PBS沖洗2-3次；

七、將培養(yǎng)板置于顯微鏡下觀察染色效果

備注：100ml瓶裝無套件，為整瓶配制。

聲明：產(chǎn)品僅科研使用。

1. Huang, J., Zeng, N., Xu, S. et al. The study on bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular matrix promoting the repair of damaged chondrocytes by regulating the Notch1/RBPJ pathway. Cytotechnology 77, 35 (2025). 

https://doi.org/10.1007/s10616-024-00702-6