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產(chǎn)品描述/Products Description
本產(chǎn)品能使膠原蛋白和纖維粘連蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)解離,而不損壞細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的完整性。使用本產(chǎn)品進(jìn)行組織消化可以使組織中細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),適用于各種正常和腫瘤組織類器官。
使用說明:
1. 提前將消化酶從-20℃冰箱取出置于2-8℃融化;
2. 用HBSS將需要消化的類器官輕輕洗1-2次,以去除舊的培養(yǎng)基
3. 加入等體積(以6孔板為例,一個(gè)孔0.5ml左右)組織消化液,并輕輕吹打類器官脫落;
4.離心管收集類器官,將沉淀重懸在 3-5 mL 組織消化液中,上下吹打并在 37°C 條件下孵育,直至類器官分解(不同的細(xì)胞孵育的時(shí)間不一樣,約兩分鐘看一次);
5.使用 P1000 移液器從頂部加入10ml含有10%KOSR-SerumReplacer?的D/F培養(yǎng)基,并在 4℃ 下以 200 g 離心 5 分鐘,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行清洗。
6.將沉淀重懸在 含有10%KOSR-SerumReplacer? 10 mL培養(yǎng)基中,并用 70~100 μm 細(xì)胞濾網(wǎng)進(jìn)行過濾。
7. 對(duì)重懸和過濾后的細(xì)胞進(jìn)行離心,在 4°C 下以 200 g 離心 5 分鐘
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品在使用前需在2-8℃溶化后使用,融化后需在一個(gè)月內(nèi)使用完畢。
2. 使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
3. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,一般在37℃條件下使用,根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況也可在2-8℃條件下使用。
4.如消化類器官做免疫熒光,為了完全去除類器官中的基質(zhì)膠,需要將混有類器官上清的離心管在冰上輕輕攪拌孵育20分鐘。
保存條件:-20℃避光保存6個(gè)月內(nèi)有效。
注意:僅科研用。
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