論怎么提取黑素細(xì)胞的小秘密

實(shí)驗(yàn)狗總是有做不完的實(shí)驗(yàn)，這不，才做了周細(xì)胞，黑素細(xì)胞又爬山涉水的趕著趟過來了，拿起手術(shù)剪，鑷子等實(shí)驗(yàn)小幫手開始操作吧！

組織樣本清理過程

a）取帶有毛孔的皮膚，1cm×1cm大小，一定要帶毛囊，酒精浸泡1分鐘后，用預(yù)冷的49%PBS+49%MEM+2%PSN沖洗兩次，再去除皮下結(jié)締組織；

b)用眼科剪將皮膚剪成0.2cm×0.5cm大小的皮膚塊，放入20mL的Dispase II酶消化液中，一定要浸沒，4℃過夜消化14-16h；

c)第二天觀察組織切口表皮和真皮有分開跡象時(shí)將皮膚放入干燥的培養(yǎng)皿中用眼科鑷揭下表皮，若表皮不易揭下，再次將皮膚放入DispaseII酶中，37℃孵育15-30min；

d)將揭下的表皮收集到35mm干燥的培養(yǎng)皿中，加入1ml的0.25％胰酶37℃消化8min；

e)加入2mL血清終止消化，吹打數(shù)次，200目細(xì)胞過濾網(wǎng)過濾，過濾后轉(zhuǎn)入15ml離心管中，1000rpm離心5min；

f)加入2mL 黑色素完全培養(yǎng)基重懸，置入35mm培養(yǎng)皿中；

g)培養(yǎng)1h-2h后，顯微鏡觀察黑素細(xì)胞貼壁，換液去掉懸浮的細(xì)胞，懸浮細(xì)胞為角質(zhì)細(xì)胞，之后每隔2天換一次培養(yǎng)基

DAY5：黑素細(xì)胞及HMSA免疫熒光染色

是不是很簡(jiǎn)單，不只是提取了黑素還拿捏了角化細(xì)胞？

還有一個(gè)秘密想要告訴您

使用以下神器，輕松得到你想要的細(xì)胞

MM黑素細(xì)胞培養(yǎng)基：

1. 低血清組分，血清含量為1%

2. 添加角化細(xì)胞堵斷小分子化合物及促黑素細(xì)胞生長(zhǎng)的蛋白讓黑素細(xì)胞自由生長(zhǎng)

3. 培養(yǎng)基不含TPA致癌小分子，避免黑色細(xì)胞在擴(kuò)增過程中的癌化

KGM角化細(xì)胞培養(yǎng)基

1. 套裝組成，使用方便；

2. 采用ITS+E替代BPE無血清的組分，減少動(dòng)物源蛋白干擾；

3. 經(jīng)多種角化細(xì)胞株及原代細(xì)胞測(cè)試，組分穩(wěn)定，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好