當(dāng)細(xì)胞遇到支原體？別怕，這樣解決，支原體無影蹤

支原體（PPLO）是一種小的（0.2–0.3微米）無壁細(xì)菌，可以在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)物中生長到非常高的濃度，通常為107–108個生物體/ml，而通過常規(guī)光學(xué)顯微鏡仍無法觀察到。使用電鏡可以觀察到，（如下圖)盡管晚期支原體污染會導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變酸性，但除下文所述外，通常沒有明顯的跡象表明培養(yǎng)物受到污染。

支原體放大后：

哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)物的特征：在污染的早期階段，支原體通常不會引起培養(yǎng)基的pH值變化，也不會對哺乳動物細(xì)胞產(chǎn)生顯著的毒性影響。支原體的生長主要與哺乳動物的細(xì)胞膜有關(guān)。在許多情況下，沒有支原體污染的跡象，然而，支原體可引起細(xì)胞生長特性的變化、細(xì)胞代謝的抑制、核酸合成的破壞、染色體畸變、細(xì)胞膜抗原性的變化，并可改變轉(zhuǎn)染率和病毒可接受性。

確認(rèn)支原體污染的唯一方法是使用特殊技術(shù)進(jìn)行常規(guī)檢測，操作流程如下圖：

培養(yǎng)物中的典型感染途徑：在大多數(shù)情況下，支原體污染是通過未經(jīng)測試的感染細(xì)胞與其他細(xì)胞系的交叉污染發(fā)生的。當(dāng)一次有一個以上的細(xì)胞系感染時，或者當(dāng)同一瓶培養(yǎng)基用于一個以上細(xì)胞系時，該污染通常是通過在移液過程中的空氣中的微觀霧化或在常規(guī)處理過程中的培養(yǎng)基開始轉(zhuǎn)移到其他細(xì)胞上。

最好的預(yù)防措施是良好的無菌技術(shù)與常規(guī)檢測相結(jié)合。在一天或一周的工作中，為了處理培養(yǎng)物，要盡量做到“從干凈到臟”。也就是說，首先處理已確認(rèn)的未受污染的細(xì)胞，其次處理未知或未經(jīng)測試的細(xì)胞，最后處理懷疑或已知受污染但因特殊原因必須留在實驗室的細(xì)胞。

抗生素：細(xì)胞培養(yǎng)中使用的大多數(shù)常規(guī)抗生素對支原體無效。硫酸慶大霉素、硫酸卡那霉素和酒石酸泰樂菌素在一定程度上是有效的，但可能只是抑制性的，而不是殺支原體的，

怎么辦？配制是個問題 ，濃度各個文獻(xiàn)所述的也不太一樣？

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