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超簡單的細胞黏附實驗protocol
來源:啟達生物 瀏覽量:1678 發(fā)布時間:2025-04-11
超簡單的細胞黏附實驗protocol
實驗步驟:
Day 1 .用包被液(啟達生物:SD0044)預(yù)鋪六孔板,500μL-1ml/孔,以底面全部浸沒為主,4℃過夜后,PBS 洗3遍,再用 1% BSA于37 ℃封閉1h,PBS清洗3遍;
Day 2.將培養(yǎng)好的細胞消化下來,用1ml完全培養(yǎng)基重懸細胞,用血球計數(shù)板計數(shù),調(diào)整濃度為5*10^5cells/mL,分別接種于預(yù)鋪包被液的6孔板中,每個孔2*10^5cells,每組設(shè)3個復(fù)孔,每孔加1ml無抗培養(yǎng)基,37℃孵育1-8h(孵育時間以細胞正常培養(yǎng)時貼壁的速度參考);孵育時間到后,再使用PBS洗去未黏附的細胞.
檢測:
5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS洗3遍;0.1%的結(jié)晶紫染色,室溫靜止0.5 h,PBS洗3遍,每孔加入500μL 10%的乙酸,5~10 min后用酶標(biāo)儀檢測595 nm的吸光度值,用以表示黏附細胞的多少。
可別小看了細胞粘附實驗,它無處不在,可用于藥物開發(fā)與篩選、腫瘤生物學(xué)研究、組織工程與再生醫(yī)學(xué)細胞間相互作用研究、疾病模型和病理研究、免疫學(xué)研究、細胞遷移與傷口愈合研究、血管生成研究等等,
相關(guān)產(chǎn)品:
細胞包被液 貨號:SD0044
細胞培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿包被使用,含有纖維粘連蛋白,促細胞貼壁基質(zhì)和明膠,主要協(xié)助細胞粘附、促進生長、引導(dǎo)遷移、調(diào)控分化、維持表型、防止細胞凋亡等作用,適合大部分貼壁不牢的原代細胞,細胞株,腫瘤細胞等





