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細(xì)胞慢病毒感染的MOI值

來源:啟達(dá)生物  瀏覽量:8660  發(fā)布時間:2022-07-15

細(xì)胞感染時,MOI值怎么計算, 加多了細(xì)胞很容易死亡,濃度不夠就會導(dǎo)致細(xì)胞感染不上,頭疼的很,以下是關(guān)于病毒的MIO值計算的絕對珍藏軟文,加入收藏中,細(xì)胞轉(zhuǎn)染隨時查閱:

首先說以下MOI是什么?MOI“Multiplicity Of Infection”的縮寫,翻譯為感染復(fù)數(shù)或感染指數(shù),含義是成功感染時的慢病毒和細(xì)胞數(shù)量比值。在實驗中,我們也將某個細(xì)胞達(dá)到80%感染效率所需的MOI值定義為該細(xì)胞的MOI,MOI指數(shù)可以通過相關(guān)文獻(xiàn)查找,

以下是啟達(dá)部分細(xì)胞的MOI值參考列表:(MOI值與細(xì)胞的代次和活力有關(guān))

啟達(dá)貨號

產(chǎn)品名稱

中文名稱

價格

MOI

CD0092

A431

人皮膚鱗癌細(xì)胞

1400

5

CD0012

A549

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

1100

5

CD0447

B16-F0

小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞

1400

6

CD0062

BxPC-3

人原位胰腺腺癌細(xì)胞

1100

10

CD0039

HCT116

人結(jié)腸癌細(xì)胞

1300

5

CD0094

HeLa

人宮頸癌細(xì)胞

1100

3

CD0021

293

人胚腎上皮細(xì)胞

1000

6

CD0180

Hepa1-6

小鼠肝癌細(xì)胞

1200

3

CD0587

HCMEC/D3

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

1500

60

CD0040

HT-29

人結(jié)腸癌細(xì)胞

1300

3

CD0290

HUVEC

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

2500

100

CD0114

Jurkat

人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

1500

10

CD0209

LLC

小鼠Lewis肺癌細(xì)胞

900

6

CD0088

LNCaP

人前列腺癌細(xì)胞

1500

5

CD0052

MCF-7

人乳腺癌細(xì)胞

1400

2

CD0053

MDA-MB-231

人乳腺癌細(xì)胞

1400

1

CD0013

MRC-5

人胚肺細(xì)胞

1400

1

CD0297

NB4

人白血病細(xì)胞

1700

10

CD0156

PC12  

大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞

1200

20

CD0032

SKOV-3

人卵巢癌細(xì)胞

1400

15

CD0066

U-2OS

人骨肉瘤細(xì)胞

1100

5

 

 

慢病毒顆粒用量的取決因素:

慢病毒滴度、MOI、感染體積、細(xì)胞密度(融合度)

 

已知目的細(xì)胞的MOI,應(yīng)使用多少慢病毒?

圖片1.png 

圖片2.png 

 

 

1×108 TU/mL病毒感染細(xì)胞所用培養(yǎng)基體積和病毒量參考,以293T細(xì)胞為例:

培養(yǎng)容器

每孔 細(xì)胞數(shù)

正常培
養(yǎng)體積

感染時
的體積

MOI=1
的慢病毒量

MOI=10
的慢病毒量

MOI=A
的慢病毒量

96-well

2.38×10^4

100 μL

100ul

0.2ul

2.4ul

0.24*A ul

48-well

4.75×10^4

200 μL

200ul

0.5ul

4.8ul

0.48A ul

24-well

9.5×10^4

400 μL

400ul

1.0ul

9.5ul

0.85*A ul

12-well

1.9×10^5

1ml

500ul

1.8ul

19ul

1.9*A ul

6-well

4.75×10^5

2ml

1ml

4.8ul

47.5ul

4.75*A ul

T25 flask

1.19 x 10^6

5ml

1.5ml

11.5ul

118.5ul

11.85*A ul

 

不同細(xì)胞種類及實驗操作存在差異,建議使用細(xì)胞計數(shù)的方法測算每孔細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞種板時的細(xì)胞合度為20-30%,一般以細(xì)胞感染3天后生長至80%-90%融合度為宜。 通常情況下,在溶液上層的慢病毒顆粒很難接近細(xì)胞。減少培養(yǎng)基的感染體積能提高病毒的感染效率。培養(yǎng)1天后,再將培養(yǎng)液補(bǔ)充至正常體積。但當(dāng)細(xì)胞板孔較小時,如果感染體積減半,液體的表面張力會使慢病毒顆粒分布不均勻,所以小孔培養(yǎng)板的感染體積和正常培養(yǎng)體積相同。


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