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產(chǎn)品描述/Products Description
Suspension? 293 (XF)懸浮培養(yǎng)基由100多種小分子化合物組成的無血清無動物組分的培養(yǎng)基,適用于細胞的293系列懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應器培養(yǎng),培養(yǎng)基不含有蛋白,添加少量激素可維持細胞內(nèi)正常蛋白表達含量,組分穩(wěn)定,批次無差異。
培養(yǎng)基配方:
500ml Suspension? 293 (XF)懸浮培養(yǎng)基(啟達生物:SP03),25ml Suspension? 293 (XF)懸浮細胞添加物(啟達生物:SP03-1),5ml G/A(啟達生物 :SD0038)
操作步驟:
細胞從常規(guī)培養(yǎng)基到無血清培養(yǎng)基的適應性訓練方法根據(jù)細胞的類型分為2種:
對于懸浮細胞(需要2-6周):
1. 當細胞密度達到最大時開始適應性訓練;
2. 加入無血清培養(yǎng)基,使無血清培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基的比例變?yōu)樵瓉淼?/2;
3. 當細胞密度達到最大時,加入無血清培養(yǎng)基,使細胞密度成為原來的1/5;
4. 培養(yǎng)細胞,如果細胞達到最大密度時,細胞的存活率大于85%,并且達到最大密度的時間與之前
相近,那么細胞可以繼續(xù)進行適應性訓練;如果細胞顯示生長緩慢或者存活率降低,那么需要重復2-3
步鄹3次;
5. 可逐步提高無血清培養(yǎng)基的比例,直至細胞可以完全在無血清培養(yǎng)基中生長。
對于貼壁細胞(需要2-6周):
1. 細胞達到最大密度時,開始適應性訓練;
2. 胰酶消化貼壁細胞,350×g離心5min收集細胞,用含5%血清的無血清培養(yǎng)基重懸,使細胞密度達
到4×10^5cells/ml;
3. 培養(yǎng)細胞至達到最大密度;
4. 重復2 - 3步驟,依次在無血清培養(yǎng)基中加入2%,1%,0.5%和0.1%的血清,進行細胞培養(yǎng);如果
細胞的存活率低于80%,那么需要恢復至前一個血清的含量,或者采用更加細化的遞減含量。
5. 直到完全使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞。
備注:100ml瓶裝無套件,為整瓶配制。
聲明:產(chǎn)品僅科研使用。
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