Suspension? BHK系列懸浮培養(yǎng)基是一款支持BHK細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基 ，由100多種小分子化合物組成， 不含有蛋白，但是含有少量激素，使用檸檬酸鐵等替代轉(zhuǎn)鐵蛋白在細(xì)胞生長(zhǎng)中的應(yīng)用，使用Suspension?系列懸浮細(xì)胞培養(yǎng)基，可培養(yǎng)的細(xì)胞最大密度在10×10^6 cells/ml 以上，無(wú)血清無(wú)蛋白組分可保持批次間無(wú)差異，使用小分子化合物培養(yǎng)能保持細(xì)胞生長(zhǎng)的正常蛋白的表達(dá)。

培養(yǎng)基配方：

500ml Suspension? BHK系列懸浮培養(yǎng)基(SP02), 25ml Suspension? BHK系列懸浮細(xì)胞添加物(SP02-1) , 

5ml G/A(SD0038）

操作步驟：

細(xì)胞從常規(guī)培養(yǎng)基到無(wú)血清培養(yǎng)基的適應(yīng)性訓(xùn)練方法根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型分為2種:

對(duì)于懸浮細(xì)胞（需要2-6周）：

1. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時(shí)開(kāi)始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 加入無(wú)血清培養(yǎng)基，使無(wú)血清培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基的比例變?yōu)樵瓉?lái)的1/2；

3. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時(shí)，加入無(wú)血清培養(yǎng)基，使細(xì)胞密度成為原來(lái)的1/5；

4. 培養(yǎng)細(xì)胞，如果細(xì)胞達(dá)到最大密度時(shí)，細(xì)胞的存活率大于85％，并且達(dá)到最大密度的時(shí)間與之前相近，那么細(xì)胞可以繼續(xù)進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練；如果細(xì)胞顯示生長(zhǎng)緩慢或者存活率降低，那么需要重復(fù)2-3步鄹3次；

5. 可逐步提高無(wú)血清培養(yǎng)基的比例，直至細(xì)胞可以完全在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞（需要2-6周）：

1. 細(xì)胞達(dá)到最大密度時(shí)，開(kāi)始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 胰酶消化貼壁細(xì)胞，350×g離心5min收集細(xì)胞，用含5％血清的無(wú)血清培養(yǎng)基重懸，使細(xì)胞密度達(dá)到4×10^5cells/ml；

3. 培養(yǎng)細(xì)胞至達(dá)到最大密度；

4. 重復(fù)2 - 3步驟，依次在無(wú)血清培養(yǎng)基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血清，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；如果細(xì)胞的存活率低于80％，那么需要恢復(fù)至前一個(gè)血清的含量，或者采用更加細(xì)化的遞減含量。

5. 直到完全使用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。

備注：100ml瓶裝無(wú)套件，為整瓶配制。

聲明：產(chǎn)品僅科研使用。