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產品描述/Products Description
Suspension? MDCK系列懸浮培養(yǎng)基是一款支持BHK細胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基 ,適用于MDCK懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應器培養(yǎng),它由100多種化合物組成, 不含有蛋白,但是含有少量激素,使用檸檬酸鐵等替代轉鐵蛋白在細胞生長中的應用,使用Suspension?系列懸浮細胞培養(yǎng)基,可培養(yǎng)的細胞最大密度在10×10^6 cells/ml 以上,培養(yǎng)基可用來轉染細胞以提高轉染效率,抗生素是獨立出來的小分裝 ,在細胞轉染的時候可不加以提高轉染效率。
培養(yǎng)基配方:
500ml Suspension? MDCK(XF)懸浮細胞培養(yǎng)基(啟達生物:SP01),25ml Suspension? MDCK(XF)懸浮細胞添加物(啟達生物:SP01-1),5ml G/A(啟達生物 :SD0038)
無血清培養(yǎng)基優(yōu)勢:
● 無血清培養(yǎng)基批次一致性高,可以省去對培養(yǎng)基進行預篩選的工作。
● 無血清培養(yǎng)基成本降低,價格波動不大。如果用血清,那么很容易受到周圍環(huán)境的影響(如天氣干旱時,血清產量降低),而使血清價格有所調整。
● 無血清培養(yǎng)基不含有絲分裂原抑制劑,可以促進細胞增殖。
● 無血清培養(yǎng)基可以降低病毒、真菌、支原體等微生物污染的可能性。
● 無血清培養(yǎng)基組分穩(wěn)定,可大量配制。
● 無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,可以簡化提純和鑒定各種細胞產物的程序。
操作步驟:
細胞從常規(guī)培養(yǎng)基到無血清培養(yǎng)基的適應性訓練方法根據細胞的類型分為2種:
對于懸浮細胞(需要2-6周):
1. 當細胞密度達到最大時開始適應性訓練;
2. 加入無血清培養(yǎng)基,使無血清培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基的比例變?yōu)樵瓉淼?/2;
3. 當細胞密度達到最大時,加入無血清培養(yǎng)基,使細胞密度成為原來的1/5;
4. 培養(yǎng)細胞,如果細胞達到最大密度時,細胞的存活率大于85%,并且達到最大密度的時間與之前相近,那么細胞可以繼續(xù)進行適應性訓練;如果細胞顯示生長緩慢或者存活率降低,那么需要重復2-3步鄹3次;
5. 可逐步提高無血清培養(yǎng)基的比例,直至細胞可以完全在無血清培養(yǎng)基中生長。
對于貼壁細胞(需要2-6周):
1. 細胞達到最大密度時,開始適應性訓練;
2. 胰酶消化貼壁細胞,350×g離心5min收集細胞,用含5%血清的無血清培養(yǎng)基重懸,使細胞密度達到4×10^5cells/ml;
3. 培養(yǎng)細胞至達到最大密度;
4. 重復2 - 3步驟,依次在無血清培養(yǎng)基中加入2%,1%,0.5%和0.1%的血清,進行細胞培養(yǎng);如果細胞的存活率低于80%,那么需要恢復至前一個血清的含量,或者采用更加細化的遞減含量;
5. 直到完全使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞。
備注:100ml瓶裝無套件,為整瓶配制。
聲明:產品僅科研使用。
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