怎么讓貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)？波洛沙姆應(yīng)它完美的剪切力占首功，為什么讓貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，有以下幾大好處：

1.減少耗材的過度使用

2.能最大量的得到細(xì)胞

3.保持提取的蛋白的一致性

對于貼壁細(xì)胞（需要2-4周）：

1. 細(xì)胞達(dá)到最大密度時，開始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 胰酶消化貼壁細(xì)胞，350×g離心5min收集細(xì)胞，用含5％血清的無血清培養(yǎng)基重懸，使細(xì)胞密度達(dá)到4×10^5cells/ml。

3. 培養(yǎng)細(xì)胞至達(dá)到最大密度；

4. 重復(fù)2 - 3步驟，依次在無血清培養(yǎng)基中加入2％，1%，0.5%和0.1%的血清，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；如果細(xì)胞的存活率低于80％，那么需要恢復(fù)至前一個血清的含量，或者采用更加細(xì)化的遞減含量。

5. 直到完全使用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。

啟達(dá)生物提供Suspension?系列培養(yǎng)基，培養(yǎng)基為無血清五動物組分配方，不含動物蛋白，采用小分子、大分子化合物和少量激素組成，適用于大規(guī)模的反應(yīng)器培養(yǎng)，無血清培養(yǎng)會有以下優(yōu)勢：

● 無血清培養(yǎng)基批次一致性高，可以省去對培養(yǎng)基進(jìn)行預(yù)篩選的工作。

● 無血清培養(yǎng)基成本降低，價(jià)格波動不大。如果用血清，那么很容易受到周圍環(huán)境的影（如天氣干旱時，血清產(chǎn)量降低），而使血清價(jià)格有所調(diào)整。

● 無血清培養(yǎng)基不含有絲分裂原抑制劑，可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。

● 無血清培養(yǎng)基可以降低病毒、真菌、支原體等微生物污染的可能性。

● 無血清培養(yǎng)基組分穩(wěn)定，可大量配制。

● 無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，可以簡化提純和鑒定各種細(xì)胞產(chǎn)物的程序。

                          Suspension? CHO (XF) 細(xì)胞懸浮培養(yǎng)基

含血清的細(xì)胞培養(yǎng)方式到無血清的培養(yǎng)方式如下：

對于懸浮細(xì)胞（需要2-4周）：

1. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時開始適應(yīng)性訓(xùn)練；

2. 加入無血清培養(yǎng)基，使無血清培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基的比例變?yōu)樵瓉淼?/2

3. 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到最大時，加入無血清培養(yǎng)基，使細(xì)胞密度成為原來的1/5；

4. 培養(yǎng)細(xì)胞，如果細(xì)胞達(dá)到最大密度時，細(xì)胞的存活率大于85％，并且達(dá)到最大密度的時間與之前相近，那么細(xì)胞可以繼續(xù)進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練；如果細(xì)胞顯示生長緩慢或者存活率降低，那么需要重復(fù)2-3步鄹3次；

5. 可逐步提高無血清培養(yǎng)基的比例，直至細(xì)胞可以完全在無血清培養(yǎng)基中生長。